代表性成果

您当前的位置： Sang Vup Lee大师工作室(蛋白表达系统与微生物代谢研究组) 代表性成果

代表性成果：

（1）大片段基因组编辑技术：建立了不依赖同源重组的基于CRISPR-Cas12k的高效基因编辑和调控工具，实现了10 kb大片段基因的高效整合和调控 （Nuc Acid Res, 2022）。

（2）蛋白质高效表达系统：拥有自主知识产权的MATE枯草芽孢杆菌蛋白表达系统并授权天津企业实现了商业化销售，可实现20余种异源蛋白质的高效分泌表达(PNAS, 2022)。

（3）过渡态理论的酶改造方法：提出了基于简化过渡态的计算迭代饱和突变方法，提升计算设计的普适性，有效跳出序列组合的局部解空间，提升阳性突变富集率，并解决了维生素合成途径限速酶催化效率低的问题 (ACS Catalysis, 2022)。

（4）高通量筛选技术及代谢物检测技术：建立了胞内代谢物PRPP、E4P、3PG的实时监测方法，建立了多种营养化学品的高通量筛选技术 (Biosensor Bioelectronics, 2020)。

（5）无细胞催化体系：开发了全36酶组装的维生素B12无细胞多酶催化合成技术，深度解析维生素B12天然催化合成过程，建立了维生素B12中间体制备检测技术。提供全新的维生素B12研究和合成方法 (Nature Comm, 2023)。

（６）复杂长途径细胞工程构建：大肠杆菌中异源表达28个基因，实现从头合成维生素B12 （Nature Comm, 2018）。

（7）营养化学品细胞工厂构建及应用：构建了维生素B12、B2、B6、K2等营养化学品细胞工厂，多个产品已经实现了产业化 (2020年天津市科技进步一等奖 )。

代表论文：

1. Linxia Liu^#, Jinlong Li^#, Yuanming Gai^#, Zhizhong Tian, Yanyan Wang, Tenghe Wang, Pi Liu, Qianqian Yuan, Hongwu Ma, Sang Yup Lee*, Dawei Zhang*. Protein engineering and iterative multimodule optimization for vitamin B6 production in Escherichia coli, Nature Communications. 2023 Aug 31;14(1):5304.

2. Qian Kang, Huan Fang, Mengjie Xiang, Kaixing Xiao, Pingtao Jiang, Chun You, Sang Yup Lee*, Dawei Zhang*. A synthetic cell-free 36-enzyme reaction system for vitamin B(12) production, Nature Communications. 2023 Aug 24;14(1):5177. 

3. Jinlong Li^#, Sijia Wang^#, Cui Liu, Yixin Li, Yu Wei, Gang Fu, Pi Liu, Hongwu Ma, Dawei Huang, Jianping Lin,* and Dawei Zhang*, Going Beyond the Local Catalytic Activity Space of Chitinase Using a Simulation-Based Iterative Saturation Mutagenesis Strategy, ACS Catalysis, 2022, 12, 16, 10235−10244.

4. Yali Cui^#, Huina Dong^#, Baisong Tong, Huiying Wang, Xipeng Chen, Guangqing Liu, Dawei Zhang*, A versatile Cas12k-based genetic engineering toolkit (C12KGET) for metabolic engineering in genetic manipulation-deprived strains, Nucleic Acids Research. 2022 Aug 26;50(15):8961-8973. doi: 10.1093/nar/gkac655.

5. Gang Fu, Jie Yue, Dandan Li, Yixin Li, Sang Yup Lee*, Dawei Zhang*，An operator-based expression toolkit for Bacillus subtilis enables fine-tuning of gene expression and biosynthetic pathway regulation, Proc Natl Acad Sci U S A. 2022 Mar 15, 119(11):e2119980119.

6. Dongqin Ding^#, Jinlong Li^#, Danyang Bai, Huan Fang, Jianping Lin*, Dawei Zhang*, Biosensor-based monitoring of the central metabolic pathway metabolites, Biosensors and Bioelectronics. 2020 Nov 1;167: 112456.

7. Huan Fang, Dong Li, Jie Kang, Pingtao Jiang, Jibin Sun, Dawei Zhang*. Metabolic engineering of Escherichia coli for de novo biosynthesis of vitamin B12. Nature Communications.2018 Nov 21;9(1):4917.