来自瘤胃真菌Piromyces rhizinflata中的高活性内切葡聚糖酶EglA可以应用在酒精乙醇等生物燃料的生产上。它属于糖苷水解酶GH5家族。EglA的催化活性区域的晶体结构表现出GH5家族典型的(β/α)8圆桶式折叠。在EglA活性位点附近,含有一个双硫键的环与底物绑定,这是在其他相类似的结构中未曾被发现。由于其活性位点被晶体中相邻蛋白分子N端的组氨酸标签所阻碍,所以酶与底物的复合体结构只能通过共结晶的方法获得。纤维三糖的突变体E154A在酶与底物间显现出大量的氢键网,并且在Trp44和-3糖之间有堆叠作用。晶体结构观察到的可能是二聚体,但是在E242A突变体的保留活性表明在溶液中酶并不以二聚体的形式发挥作用。另一方面,原始cDNA片段的前100个氨基酸编码与(β/α)8圆桶式折叠的最后三个非常相似,这预示着EglA至少含有两个催化活性区域。
该项研究成果为应用及改造内切葡聚糖提供了坚实的基础,相关研究结果已被Acta Crystallographica Section F Structural Biology and Crystallization Communications接受,并获选为2011年10月的封面文章。该项目获得工业酶国家工程实验室及天津市专项(10ZCKFSY06000)的支持。